食用菌制种技术
2010-03-07 07:25:58 作者： 肖淑媛 何 颖 来源：益阳职业技术学院 浏览次数：0 网友评论 0 条
食用菌制种技术
益阳职业技术学院 肖淑媛 何 颖(413000)
随着食用菌产业的蓬勃发展，菌种需要量随之增加，而现有菌种生产单位明显偏少，许多菇农不得不在外地引种。长途购运菌种不仅花费大、成本高，而且菌种因破瓶易引起杂菌污染，从而严重影响栽培食用菌的经济效益。菇农若能掌握菌种生产程序和制种技术，实行自行制种，逐步发展成制种专业户，也是一条很好的致富门路。
菌种生产程序，通常分为母种、原种和栽培种3个层次，也就是通常所说的一级、二级、三级菌种。其中母种的分离选育技术性强，要求精化；而原种和栽培种的制作则相对比较简单。下面介绍各级菌种的制作技术。
一、母种的分离选育
母种主要采用人工选择、诱变育种、杂交育种和原生质融合等手段获得。作为一般制种专业户，可以采用人工选择方式分离培育母种，具体步骤与操作方法如下。
1.采集种源 从野生或人工栽培群体中，选择有代表性的优良菇体作为种源。①种菇选择时间。一般在11月上中旬，在第1批和第2批菇中挑选。因为这段时间磨菇生长正是旺盛时期，菌丝生活力强，子实体健壮，质量好，加之气温适宜，磨菇能正常成熟。②种菇的标准是：八成熟、朵形圆正、肉质肥厚，颜色洁白，无病虫害。采集一二朵符合上述标准的种菇编上号码，作为分离母种的材料。从栽培室采集的应标有原菌株代号。
2.培养基配制 琼脂培养基又叫PDA培养基，常用配方为：马铃薯200克、琼脂16克～18克、葡萄糖20克、水1000毫升。先将马铃薯洗净去皮，切成薄片，置于铝锅内加水煮沸15分钟～30分钟至薯块酥而不烂为止。煮后用6层～8层事先浸湿拧干的纱布过滤，过滤后加入琼脂16克～18克（气温低时加16克，气温高时加18克）再煮，并不断搅拌，使固体琼脂完全溶化，再用4层～6层纱布过滤。将滤液加水至1000毫升加入20克葡萄糖，搅拌溶化趁热分装试管。装入量为试管高度的1/4～1/5，注意培养基不要粘着试管口，管口用棉塞塞紧，或将汁液装入玻璃三角瓶内，每瓶装量为20毫升。然后置于高压锅内，在压力达108大气压强，锅内温度为121℃灭菌30分钟左右。灭菌后及时取出，趁热将试管斜排于桌上，冷却后即成为固体斜面培养基。
3.母种分离方法 有孢子弹射、组织分离和基质菌丝分离3种方法。这里主要介绍组织分离方法。组织分离方法：即切取各菇上小块组织移接于斜面培养基上，培养成母种。食用菌的子实体实际上就是双核菌丝的纽结物，它具有很强的再生能力。因此，只要切取一小块组织，把它接种到适宜的培养基上，适温培养，就能得到纯菌丝体。这是一种无性繁殖方法，具有操作简便、有利于保持原有品系的遗传特性、分离成功率高等特点。组织分离是把选好的种菇带入无菌室，在超净工作台上，用75%的洒精棉揩试菌盖与菌柄，再用经火焰灭菌的角剖刀在菌柄的中部切开。使菇体形成对开。在菌盖和菌柄交界处或菌褶处，用接种刀切取一小块菇体，然后纵切成5毫米×10毫米的小薄片，用接种针挑取一块薄片，接入斜面培养基的中央，每支试管接种一小块薄片，待其萌发菌丝，即可得到母种。
4.适温培养 将上述试管放入已消毒的培养箱或培养室内培养，温度控制在25℃左右，使分离获得的孢子或菌丝在适温下发育。组织分离接种后二三天，菌丝即萌发，并在培养基上蔓延生长；菇木分离接种后，一般情况下组织块先转为黑褐色，大约7天后组织培养块上长出白色绒毛状菌丝。
5.母种的提纯 经组织分离获得的母种，常常因操作不严或其他原因带进杂菌，以致所分的菌种不纯或分离失败，故提纯非常重要。因此，在菌丝萌发后，要认真观察，挑选色泽纯、健壮、长势正常和无间断的菌线，在无菌室超净工作台上连同培养基钩取菌丝，接入另备的试管培养基上。在23℃～25℃的恒温条件下，培养7天～10天，待菌丝长满管后，再进行观察，从中择优取用，即为“母代”母种。
6.母种的转管培养 母种的转管培养方法，是将一支长满斜面培养基的试管在无菌操作下，分别接入多只试管中培养。一般每支母种可扩接30支～50支，生产上供应的多为子代母种。它可以再次转管扩接。一般每支又可扩接成20支～25支子代母种，但转管次数不得超过4次。因转管代数过多易引起生理上的老化和感染杂菌，从而使菌种生活力降低。
7.出菇试验 分离选育的母种，还必须进行出菇试验。其方法是：把母种接种于瓶或袋装的木屑培养基上，根据各种菇耳种性对温度的要求，进行适温培养，直至出菇才证实可用于生产。
二、原种繁殖培养
将母种接在瓶或袋的木屑培养基上，通过培养，即成原种。
三、栽培种扩大培育
将原种再次扩接在同样的木屑培养基上，在适温条件下培养30天～35天即为栽培种（又叫生产种），可用于生产栽培。（完）
已有
